外源甜菜碱对低温胁迫下结缕草生理特性的影响
梁小红1, 安勐颍1, 宋峥2, 徐广臣1, 濮阳雪华1,*
1.北京林业大学草坪研究所, 北京 100083
2.北京东方园林生态股份有限公司, 北京 100012
*通讯作者Corresponding author. E-mail:puyangxuehua@163.com

作者简介:梁小红(1979-),女,辽宁本溪人,实验师。E-mail:liang81511@163.com

摘要

甜菜碱作为一种重要的渗透调节物质,与低温胁迫下植物的抗逆性有着密切的联系。为了探讨不同浓度外源甜菜碱对低温胁迫下结缕草相关生理指标的影响,本实验以结缕草‘青岛’品种为实验材料,分别采用0,50,100和150 mmol/L 的甜菜碱进行叶面喷施,在8/2℃(白天/夜间)的培养箱中连续处理28 d,以正常管理(28/24℃)作为对照。结果表明:外源甜菜碱能够有效缓解低温胁迫下结缕草坪观质量和叶绿素含量的下降,减少电解质渗透率和丙二醛含量的升高,显著提高SOD、POD、CAT和APX的活性,从而降低H2O2O2·-的累积,同时,外源甜菜碱还可以提高低温胁迫下结缕草可溶性蛋白和脯氨酸的含量,增强渗透调节能力,进而增强结缕草对低温胁迫的抵抗性。其中,外施100 mmol/L甜菜碱对提高结缕草的耐低温能力的效果最为显著。

关键词: 结缕草; 低温胁迫; 甜菜碱; 生理特性
Effects of exogenous glycine betaine on the physiological characteristics of Zoysia japonica under low-temperature stress
LIANG Xiao-Hong1, AN Meng-Ying1, SONG Zheng2, XU Guang-Chen1, PUYANG Xue-Hua1,*
1.Institute of Turfgrass Science, Beijing Forestry University, Beijing 100083, China
2.Beijing Orient Landscape Ecological Co., Ltd, Beijing 100012, China
Abstract

Glycine betaine (GB) is an important compatible solute that is associated with stress tolerance in plants under low-temperature stress. To investigate the effect of exogenous GB on the physiological indexes of Zoysia japonica under low-temperature stress, GB at 0, 50, 100, and 150 mmol/L was applied as a foliar spray to ‘Qingdao’, a Z. japonica cultivar, before transferring the plants to growth chambers. The plants were grown under average temperatures of 8℃/2℃ (day/night) for 28 days in the low-temperature treatment, and under average temperatures of 28℃/24℃ (day/night) in the control. Exogenous GB alleviated the loss of turf quality and chlorophyll content, and reduced the increase in electrolyte leakage and malondialdehyde content in Z. japonica under low-temperature stress. Exogenous GB increased the activities of superoxide dismutase, peroxidase, catalase, and ascorbate peroxidase, leading to lower H2O2 andO2·- contents. Also, exogenous GB enhanced the osmotic adjustment capacity of the plants by increasing the concentrations of proline and soluble protein. These results indicated that exogenous GB enhanced the resistance of Z. japonica to low-temperature stress, and 100 mmol/L exogenous GB was the most effective concentration.

Keyword: Zoysia japonica; low-temperature stress; glycine betaine; physiological characteristics

结缕草属(Zoysia)是一种隶属禾本科(Gramineae), 虎耳草亚科(Chloridoideae)的多年生C4型草本植物, 主要分布于亚洲东部地区, 在澳洲、非洲等比较温暖的地区也有分布, 也是我国常用的多年生暖季型草坪草之一[1]。目前研究表明, 结缕草属主要包括11个种, 若干个变种和变型, 其中在我国自然分布的有5个种和2个变种, 它们分别是结缕草(Zoysia japonica)、中华结缕草(Zoysia sinica)、沟叶结缕草(Zoysia matrella)、细叶结缕草(Zoysia tenuifolia)和大穗结缕草(Zoysia macrostachya)5个种以及青结缕草(Zoysia japonica var. pollida)和长花结缕草(Zoysia sinica var. nipponica)2个变种[2]。结缕草叶片厚硬而近革质, 适宜温暖湿润性气候, 耐高温、耐阴性及耐旱性较强, 此外, 结缕草还具有耐盐碱, 抗病虫害, 耐粗放管理, 耐践踏、耐贫瘠等优良特性, 因此, 结缕草具有很强的适应性和抗逆性, 在我国被广泛应用于城市园林绿化、水土保持、边坡修复等诸多领域[2, 3, 4]。但是, 结缕草也具有绿期短的缺点, 在冬季会枯黄休眠, 从而大大降低了其观赏价值, 限制了其在过渡带及北方地区的推广和使用[5]。因而, 如何提高结缕草对低温胁迫的抵抗性, 延长结缕草的绿期, 已经成为国内外众多学者关注的问题之一。

甜菜碱(GB)是一种烷基烃类含氮化合物, 属于甘氨酸的季铵衍生物, 它可以和多种氨基酸结合形成新的复合物, 譬如甘氨酸甜菜碱、脯氨酸甜菜碱及组氨酸甜菜碱等, 其中甘氨酸甜菜碱是结构最为简单, 研究最为广泛的一类甜菜碱, 它广泛分布于动植物和微生物体内[6, 7]。植物受到逆境胁迫时, 甜菜碱可以作为渗透调节物质参与植物细胞的渗透调节, 亦可作为渗透保护物质来提高生物大分子结构和功能的稳定性[8]。因此, 在低温和盐渍等逆境胁迫下, 甘氨酸甜菜碱可以提高植物的抗逆性, 研究表明, 外源甜菜碱可以提高小麦(Triticum aestivum)、大麦(Hordeum vulgare)、烟草(Nicotiana tabacum)、黄瓜(Cucumis sativus)、玉米(Zea mays)等多种植物对低温胁迫的抵抗性[9, 10, 11, 12, 13]。然而, 目前关于外源甜菜碱对提高草坪草抗寒性的相关研究较少, 尤其是寒冷胁迫下, 外源甜菜碱对结缕草生理代谢影响的报道甚少。因此, 开展相关研究有利于进一步阐明甜菜碱对提高结缕草耐寒能力的生理机制, 从而延长结缕草的绿期, 为结缕草的进一步推广和应用奠定理论基础。

1 材料与方法
1.1 实验材料

本研究选择结缕草‘ 青岛’ 为研究对象, 结缕草种子由青岛海源草坪有限责任公司提供。2013年7月将种子播种于直径16 cm, 高度15 cm的塑料花盆中, 播种量为20 g/m2, 花盆中的基质为草炭:蛭石:沙=4:2:1的混合物。播种后的植物材料在温室中培养4个月, 温室条件为光周期14 h, 光合有效辐射(PAR)400 μ mol/(m2· s), 温度白天28℃, 夜间24℃。在生长期间, 每3 d浇水1次, 每周采用半强度Hoagland营养液施肥1次[14], 成坪后每周修剪至约10 cm高。

1.2 低温处理与取样

在低温处理前3周, 所有的植物材料被转移至培养箱中, 培养箱的培养条件同温室条件。在2周的适应生长后, 即低温胁迫处理前1周, 处理组结缕草分别被喷施浓度为0, 50, 100, 150 mmol/L的甜菜碱。低温处理条件为光周期14 h, 光合有效辐射(PAR)400 μ mol/(m2· s), 温度白天8℃, 夜间2℃, 低温处理时间共28 d。以正常管理作为对照组。分别在低温处理后的第0, 7, 14, 21和28天取样, 液氮速冻后转移至-80℃冰箱进行保存。

1.3 测定指标及方法

坪观质量参照Turgeon[15]的方法, 采用1~9分制进行评分; 叶绿素含量采用95%乙醇提取测定[16]; 电解质渗透率采用Blum和Ebercon[17]的方法测定; 丙二醛含量采用Heath 和 Packer[18]的方法测定; 过氧化氢含量的测定采用文献[19]的方法; 超氧阴离子含量采用Jiang 和Zhang[20]的方法测定; 抗氧化酶活性的测定采用Zhang 和 Kirkham[21]的方法; 可溶性蛋白含量的测定采用Bradford[22]的方法; 脯氨酸含量采用李合生[23]的方法测定。

1.4 数据分析

实验设置4个重复, 采用Excel 2013和SPSS 18.0进行统计分析, 并使用Excel 2013作图。

2 结果与分析
2.1 外源甜菜碱对低温胁迫下结缕草伤害指标的影响

2.1.1 坪观质量和叶绿素含量 低温胁迫导致结缕草的坪观质量和叶绿素含量呈显著下降趋势(P< 0.05), 在第28天时, 结缕草坪观质量为4.7分, 处于不可接受状态, 叶绿素含量与对照相比下降了71.71%(图1)。与单独低温胁迫相比, 外施3种不同浓度的甜菜碱都在一定程度上缓解了坪观质量和叶绿素含量的下降, 其中, 外施100 mmol/L甜菜碱的缓解效果最为显著, 而外施150 mmol/L甜菜碱缓解作用较小, 尤其是对叶绿素含量的影响。在第28天时, 100 mmol/L甜菜碱预处理的结缕草坪观质量得分为6.7分, 依然处于可接受状态, 叶绿素含量相比单独低温胁迫升高了1.21倍。

图1 外施不同浓度甜菜碱对低温胁迫下结缕草坪观质量和叶绿素含量的影响
CK(对照组)=常温+0 mmol/L 甜菜碱; T0=低温胁迫+0 mmol/L甜菜碱; T1=低温胁迫+50 mmol/L甜菜碱; T2=低温胁迫+100 mmol/L甜菜碱; T3=低温胁迫+150 mmol/L甜菜碱。图中上方的垂直线条表示同一时间下不同处理之间的标准误(P< 0.05)。下同。
Fig.1 Effects of exogenous glycine betaine (GB) with different concentrations on turf quality and chlorophyll content of Z. japonica under low-temperature stress
CK (control)=normal temperature+0 mmol/L GB; T0=low temperature+0 mmol/L GB; T1=low temperature+50 mmol/L GB; T2=low temperature+100 mmol/L GB; T3=low temperature+150 mmol/L GB. Vertical bars on the top indicate least significant difference values (P< 0.05) for treatment comparison at a given day of treatment. The same below.

2.1.2 电解质渗透率和丙二醛含量 由图2可知, 低温胁迫导致结缕草的电解质渗透率和丙二醛含量呈显著上升趋势(P< 0.05), 到第28天时, 单独低温胁迫的结缕草电解质渗透率和丙二醛含量与对照相比分别增加了185.84%和99.47%。外施3种不同浓度的甜菜碱都在一定程度上缓解了低温胁迫引起的电解质渗透率和丙二醛含量的上升, 而且, 外施100 mmol/L甜菜碱的缓解效果最为显著。在第28天时, 与单独低温胁迫相比, 100 mmol/L甜菜碱预处理的结缕草电解质渗透率和丙二醛含量分别降低了44.9%和23.6%。

图2 外施不同浓度甜菜碱对低温胁迫下结缕草电解质渗透率和丙二醛含量的影响Fig.2 Effects of exogenous glycine betaine with different concentrations on electrolyte leakage and MDA content of Z. japonica under low-temperature stress

2.2 外源甜菜碱对低温胁迫下结缕草抗氧化响应指标的影响

2.2.1 过氧化氢和超氧阴离子含量 低温胁迫导致结缕草的H2O2含量和 O2·-含量呈显著上升趋势(P< 0.05), 到第28天时, 单独低温胁迫的结缕草H2O2含量和 O2·-含量与对照相比分别升高了1.61和1.32倍(图3)。与单独低温胁迫相比, 外施3种不同浓度的甜菜碱都显著降低了H2O2含量和 O2·-含量, 其中, 外施100 mmol/L甜菜碱的缓解效果最为明显。在第28天时, 相比单独低温胁迫, 100 mmol/L甜菜碱预处理的结缕草H2O2含量和 O2·-含量分别下降了44.4%和40.0%。

图3 外施不同浓度甜菜碱对低温胁迫下结缕草H2O2含量和 O2·-含量的影响Fig.3 Effects of exogenous glycine betaine with different concentrations on H2O2 and O2·- content of Z. japonica under low-temperature stress

2.2.2 抗氧化酶活性 由图4可知, 低温胁迫显著提高了结缕草4种抗氧化酶的活性(P< 0.05)。低温胁迫处理条件下, 超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活性分别在第14, 28, 21和28天时达到峰值, 与对照相比其活性分别提高了151.09%, 67.18%, 110.99%和72.22%。与单独低温胁迫处理相比, 外施3种不同浓度的甜菜碱均在不同程度上提高了4种抗氧化酶的活性, 其中100 mmol/L 的外源甜菜碱作用效果最为显著, 而150 mmol/L的外源甜菜碱作用效果较小, 尤其是对CAT和APX活性的影响。相比单独低温胁迫, 100 mmol/L甜菜碱预处理的结缕草SOD、POD、CAT和APX的活性分别在第14, 28, 21和28天时增加了82.5%, 47.4%, 77.2%和68.5%。

图4 外施不同浓度甜菜碱对低温胁迫下结缕草抗氧化酶活性的影响Fig.4 Effects of exogenous glycine betaine with different concentrations on antioxidant enzyme activity of Z. japonica under low-temperature stress

2.3 外源甜菜碱对低温胁迫下结缕草渗透调节指标的影响

2.3.1 可溶性蛋白含量 低温胁迫下结缕草的可溶性蛋白含量呈现先增加后下降的趋势, 其含量在第14天时达到峰值, 与对照相比增加了94.74%(图5)。同单独低温处理相比, 外施100 mmol/L甜菜碱显著提高了结缕草的可溶性蛋白含量, 在第14天时增加了72.7%, 而外施50和150 mmol/L甜菜碱对低温胁迫下结缕草可溶性蛋白含量的影响并不显著。

图5 外施不同浓度甜菜碱对低温胁迫下结缕草可溶性蛋白含量的影响Fig.5 Effects of exogenous glycine betaine with different concentrations on soluble protein content of Z. japonica under low-temperature stress

2.3.2 脯氨酸含量 从第14天开始, 低温胁迫显著提高了结缕草的脯氨酸含量(P< 0.05), 在第21天时, 单独低温胁迫的结缕草脯氨酸含量达到峰值, 与对照相比提高了22.46倍, 此后其含量开始呈现下降趋势(图6)。在第28天时, 与单独低温胁迫处理相比, 外施50和100 mmol/L的甜菜碱分别使脯氨酸含量提高了1.65和3.73倍, 而外施150 mmol/L的甜菜碱与单独低温胁迫处理相比没有显著差异。

图6 外施不同浓度甜菜碱对低温胁迫下结缕草脯氨酸含量的影响Fig.6 Effects of exogenous glycine betaine with different concentrations on proline content of Z. japonica under low-temperature stress

3 讨论与结论

坪观质量是评价草坪质量好坏最直接的指标, 更是评价草坪优劣的综合性指标[24]。从本研究的结果可以看出, 低温胁迫会显著降低结缕草的坪观质量, 而外施甜菜碱则可有效的缓解低温胁迫对坪观质量的影响, 使结缕草保持较高的坪观质量。叶绿素是植物光合作用中不可缺少的重要物质, 更是反应叶片受伤程度最为直接的指标[25, 26]。本实验中, 低温胁迫显著降低了结缕草的叶绿素含量, 这与前人的研究结果相一致[27, 28]。这可能是由于低温胁迫不仅破坏了叶绿体的超微结构, 导致光合色素降解, 而且抑制了叶绿素的合成, 从而降低了叶绿素的含量。外施甜菜碱则显著缓解了低温胁迫下结缕草叶绿素含量的降低, 说明外施甜菜碱可以保护低温胁迫下结缕草的叶绿体结构, 从而使结缕草的叶绿素含量保持较高水平。

细胞膜系统是植物感受低温最敏感的部位, 也是植物抵抗低温伤害的关键结构。电解质渗透率和丙二醛含量通常可以有效地反映出细胞膜系统的伤害程度和膜脂的过氧化程度[29, 30]。本研究表明, 低温胁迫显著增加了结缕草细胞膜的电解质渗透率和丙二醛含量, 说明低温胁迫导致了膜脂过氧化反应, 破坏了结缕草的细胞膜系统。研究表明, 甜菜碱能够防止细胞膜的热变性, 降低原生质膜从液晶相转变为凝胶相的温度, 从而对低温胁迫下的细胞膜的完整性起到保护作用[31]。也有研究指出, 甜菜碱可以稳定低温胁迫下的细胞膜结构是由于甜菜碱的季铵化阳离子特性可以结合细胞膜上的羟基阴离子[32]。本实验中, 外施甜菜碱显著降低了低温胁迫下结缕草的电解质渗透率和丙二醛含量, 说明外施甜菜碱能够缓解低温胁迫下结缕草的膜脂过氧化反应, 对结缕草细胞膜系统的完整性起到了一定的保护作用, 进而提高了结缕草对低温胁迫的抵御能力。

低温胁迫下植物体内积聚的活性氧是导致膜脂过氧化反应, 细胞膜结构遭到破坏的重要原因, 其中H2O2O2·-是2个最常见的活性氧[33, 34]。本研究表明, 低温胁迫显著提高了结缕草的H2O2O2·-含量, 说明低温胁迫使得自由基的产生和清除处于失衡的状态, 植物体内积聚了大量的H2O2O2·-, 造成了结缕草细胞膜的膜脂过氧化反应, 进而导致丙二醛含量的上升。因此, 提高植物的抗氧化代谢能力来清除活性氧对植物抵御低温胁迫至关重要。酶促防御系统中, SOD负责将 O2·-歧化成为H2O2, 而CAT和POD则分别在叶绿体和细胞质将H2O2降解为无毒害作用的水分子和氧气, 同时APX则参与抗坏血酸-谷胱甘肽循环, 催化抗坏血酸和H2O2反应从而协助清除植物体内的H2 O235。本实验中, 外施甜菜碱显著提高了低温胁迫下4种抗氧化酶的活性, 从而降低了H2O2O2·-含量。研究表明, 甜菜碱可以防止蛋白质结构受到其他物质的破坏, 稳定蛋白质的四级结构, 尤其是在胁迫条件下, 甜菜碱可以作为一种低分子量的伴侣分子来起到对酶蛋白构象的稳定作用, 并使酶蛋白处于激活且有功能的状态, 增强酶的活力[36, 37]。因此, 外施甜菜碱可以有效激活结缕草的酶促防御系统, 增强低温胁迫下结缕草的抗氧化酶活性, 从而清除低温胁迫诱导出的多余的活性氧, 进而提高了结缕草抵御低温胁迫的能力。

可溶性蛋白和脯氨酸是植物体内的2种重要的渗透调节剂。可溶性蛋白和脯氨酸本身都具有很强的亲水性, 其含量的增加会提高细胞内束缚水的含量, 进而保护细胞膜免受脱水的伤害, 来达到提高植物抵御低温胁迫能力的目的[38]。本研究表明, 低温胁迫显著增加了结缕草的可溶性蛋白和脯氨酸含量, 并且外施甜菜碱进一步增加了其含量。相关研究指出, 增加的可溶性蛋白很可能是一些植物抵御低温胁迫相关的或有专一性的功能蛋白酶[39]。也有研究表明, 甜菜碱可能在加速低温胁迫下受到损伤的蛋白质的从头合成过程中起到一定作用[40]。因此, 外施甜菜碱能够通过可溶性蛋白和脯氨酸的渗透调节作用, 进一步提高结缕草对低温胁迫的抵抗性。

综上所述, 外源甜菜碱能够有效缓解低温胁迫下结缕草坪观质量和叶绿素含量的降低, 减少电解质渗透率和丙二醛含量的升高, 一方面是通过提高结缕草的抗氧化代谢能力, 增强了SOD、POD、CAT和APX的活性, 从而清除了多余的H2O2O2·-, 进而保护了细胞膜结构的稳定性, 提高了结缕草抵御低温胁迫的能力; 另一方面是通过提高可溶性蛋白和脯氨酸的渗透调节能力, 增强胞内渗透势, 减少细胞失水, 进而提高结缕草对低温胁迫的抵抗性。其中, 外施100 mmol/L甜菜碱对提高结缕草抵御低温胁迫能力的效果最为显著。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] Editorial Committee of Flora Reipublicae Popularis Sinicae. Flora Reipublicae Popularis Sinicae[M]. Beijing: Science Press, 1990. [本文引用:1]
[2] Dong H D, Gong L J. Ecology of Zoysia japonica and the Exploitation and Application of Its Resources in China[M]. Beijing: China Forestry Publishing House, 2001. [本文引用:2]
[3] Liu J X, He S A, Liu Y D. Characteristics and economic value of warm season turfgrasses in east China. Grassland of China, 1997, (4): 62-66, 78. [本文引用:1]
[4] Wang Y, Li J L, Jiang T, et al. Effect of pre-treatments with SA, H2O2 and 6-BA on chilling tolerance in Zoysia matrella. Acta Prataculturae Sinica, 2010, 19(2): 76-81. [本文引用:1]
[5] Wang D, Xuan J P, Guo H L, et al. Seasonal changes of freezing tolerance and its relationship to the contents of carbohydrates, proline, and soluble protein of Zoysia. Acta Prataculturae Sinica, 2011, 20(4): 98-107. [本文引用:1]
[6] Lu J, Yin H, Zhang P. Research progress and application prospect analysis in tobacco on glycine betaine. Chinese Agricultural Science Bulletin, 2012, 28(19): 85-89. [本文引用:1]
[7] Wei J X. Physiological Effects of Exogenous Glycine Betaine on Cold Resistance in Banana Seedlings[D]. Danzhou: South China University of Tropical Agriculture, 2007. [本文引用:1]
[8] Li Y H, Zou Q. Genetic engineering of enzymes related to glycine betaine synthesis in plants. Plant Physiology Communications, 2002, 38(5): 500-504. [本文引用:1]
[9] Kamata T, Uemura M. Solute accumulation in wheat seedlings during cold acclimation: Contribution to increased freezing tolerance. Cryoletters, 2004, 25(5): 311-322. [本文引用:1]
[10] Kishitani S, Watanabe K, Arakawa S, et al. Accumulation of glycinebetaine during cold acclimation and freezing tolerance in leaves of winter and spring barley plants. Plant, Cell and Environment, 1994, 17(1): 89-85. [本文引用:1]
[11] Wang C, Ma X L, Hui Z, et al. Glycine betaine improves thylakoid membrane function of tobacco leaves under low-temperature stress. Photosynthetica, 2008, 46(3): 400-409. [本文引用:1]
[12] Li Y Y. Study on the Enhancement of Cold Resistance in Cucumber Seedlings by Exogenous Glycine Betaine[D]. Guangzhou: South China Normal University, 2003. [本文引用:1]
[13] Huang L H. Effect of exogenous betaine on cold resistance of corn seedlings. Hubei Agricultural Sciences, 2006, 45(2): 168-170. [本文引用:1]
[14] Hoagland D R, Arnon D I. The water culture method for growing plants without soil. California Agricultural Experiment Station Circular, 1950, 347: 1-32. [本文引用:1]
[15] Turgeon A J. Turfgrass Management (8th Ed. )[M]. Pearson Prentice Hall, Upper Saddle River, NJ, 2008. [本文引用:1]
[16] Smethurst C F, Shabala S. Screening methods for waterlogging tolerance in lucerne: comparative analysis of waterlogging effects on chlorophyll fluorescence, photosynthesis, biomass and chlorophyll content. Functional Plant Biology, 2003, 30(3): 335-343. [本文引用:1]
[17] Blum A, Ebercon A. Cell membrane stability as a measure of drought and heat tolerance in wheat. Crop Science, 1981, 21(1): 43-47. [本文引用:1]
[18] Heath R L, Packer L. Photoperoxidation in isolated chloroplasts: I. Kinetics and stoichiometry of fatty acid peroxidation. Archives of Biochemistry and Biophysics, 1968, 125(1): 189-198. [本文引用:1]
[19] Velikova V, Yordanov I, Edreva A. Oxidative stress and some antioxidant systems in acid rain-treated bean plants: protective role of exogenous polyamines. Plant Science, 2000, 151(1): 59-66. [本文引用:1]
[20] Jiang M Y, Zhang J H. Effect of abscisic acid on active oxygen species, antioxidative defense system and oxidative damage in leaves of maize seedlings. Plant and Cell Physiology, 2001, 42(11): 1265-1273. [本文引用:1]
[21] Zhang J X, Kirkham M B. Enzymatic responses of the ascorbate-glutathione cycle to drought in sorghum and sunflower plants. Plant Science, 1996, 113(2): 139-147. [本文引用:1]
[22] Bradford M M. A rapid and sensitive method for the quantitative determination of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Analytical Biochemistry, 1976, 72: 248-254. [本文引用:1]
[23] Li H S. Experimental Principle and Technology of Plant Physiology and Biochemistry[M]. Beijing: Higher Education Press, 2000. [本文引用:1]
[24] Zheng H J, Hua L, Gao Z G. A study on indices system and assessment of turf quality. Journal of Capital Normal University (Natural Science Edition), 2003, 24(1): 78-82. [本文引用:1]
[25] Zhang R H, Guo D W, Zhang X H, et al. Effects of nitrogen on photosynthesis and antioxidant enzyme activities of maize leaf under drought stress. Journal of Maize Sciences, 2012, 20(6): 118-122. [本文引用:1]
[26] Dai Y C, Huang L, Chen L B. Identification and exploitation of chilling-resistance physiology in rice Xiang 25 (indica type) seeding upon five resistants. Journal of Natural Science of Hunan Normal University, 2000, 23(3): 88-94. [本文引用:1]
[27] Liang G J, Zhong J B, Shao L. Effects of “Leaf-Growing-Reagent for warm-season turf” on cold-resistance and chlorophyll content of Zoysia tenuifolia in winter. Pratacultural Science, 2004, 21(8): 85-88. [本文引用:1]
[28] Liu Y Q, Gao P, Lu L M, et al. Research progress of low-temperature stress and cold-resistance on turfgrass. Shand ong Agricultural Sciences, 2012, 44(3): 53-57. [本文引用:1]
[29] Cai S Z, Pan Y Z, Chen Q B, et al. Effects of low temperatures on physiological and biochemical indexes and growth of Asarum splendens. Acta Prataculturae Sinica, 2010, 19(1): 95-102. [本文引用:1]
[30] Guo Y P, Mi F G, Yan L J, et al. Physiological response to drought stress and drought resistances evaluation of different Kentucky bluegrass varieties. Acta Prataculturae Sinica, 2014, 23(4): 220-228. [本文引用:1]
[31] Hincha D K. High concentrations of the compatible solute glycinebetaine destabilize model membrances under stress conditions. Crybiology, 2006, 53(1): 58-68. [本文引用:1]
[32] Coughlan S J, Heber U. The role of glycinebetaine in the protection of spinach thylakoids against freezing stress. Planta, 1982, 156(1): 62-69. [本文引用:1]
[33] Wang Y, Li J L, Deng L, et al. Effect of H2O2 on the antioxidative system and chilling tolerance in Manilagrass (Zoysia matrella). Chinese Journal of Grassland , 2010, 32(2): 92-97. [本文引用:1]
[34] Sun Y J, Jin P, Shan T M, et al. Effect of glycine betaine treatment on postharvest chilling injury and active oxygen metabolism in loquat fruits. Food Science, 2014, 35(14): 210-215. [本文引用:1]
[35] Foyer C H, Noctor G. Redox sensing and signaling associated with reactive oxygen in chloroplasts, peroxisomes and mitochondria. Physiologia Plantarum, 2003, 119(3): 355-364. [本文引用:1]
[36] Batenan J B, Evans G F, Brown P R, et al. Dielectric properties of the system bovine albumin urea: Betaine in aqueous solution. Physics in Medicine and Biology, 1992, 37(1): 175-182. [本文引用:1]
[37] Nomura M, Takabe T, Sugiyama T, et al. Transgenically produced glycinebetaine protects ribulose 1, 5-bisphodphate carboxylase/oxygenase from inactivation in Synechococcus sp. PCC7942 under salt stress. Plant and Cell Physiology, 1998, 39(4): 425-432. [本文引用:1]
[38] Ren J, Huang Z L, Zeng L X, et al. A review of physiological reaction mechanism of plants exposed to low temperature stress. World Forestry Research, 2014, 26(6): 15-20. [本文引用:1]
[39] Zhang Y. Studies on the Low-temperature Physiology in Rice and Its Chilling Resistance[D]. Yanbian: Yanbian University, 2007. [本文引用:1]
[40] Alia, Kondo Y, Sakamoto A, et al. Enhanced tolerance to light stress of transgenic Arabidopsis plants that express the codA gene for a bacterial choline oxidase. Plant Molecular Biology, 1999, 40(2): 279-288. [本文引用:1]
[1] 中国植物志编委会. 中国植物志[M]. 北京: 科学出版社, 1990. [本文引用:1]
[2] 董厚德, 宫莉君. 中国结缕草生态学及其资源开发与应用[M]. 北京: 中国林业出版社, 2001. [本文引用:2]
[3] 刘建秀, 贺善安, 刘永东. 华东地区暖地型草坪草特征特性及其经济价值. 中国草地, 1997, (4): 62-66, 78. [本文引用:1]
[4] 王艳, 李建龙, 姜涛, . SA、H2O2和6-BA预处理对沟叶结缕草耐寒性的影响. 草业学报, 2010, 19(2): 76-81. [本文引用:1]
[5] 王丹, 宣继萍, 郭海林, . 结缕草的抗寒性与体内碳水化合物、脯氨酸、可溶性蛋白季节动态变化的关系. 草业学报, 2011, 20(4): 98-107. [本文引用:1]
[6] 卢军, 殷红, 张平. 甜菜碱的研究进展及其在烟草中应用前景分析. 中国农学通报, 2012, 28(19): 85-89. [本文引用:1]
[7] 韦建学. 外源甜菜碱对香蕉幼苗抗冷生理效应的影响[D]. 儋州: 华南热带农业大学, 2007. [本文引用:1]
[8] 李永华, 邹琦. 植物体内甜菜碱合成相关酶的基因工程. 植物生理学通讯, 2002, 38(5): 500-504. [本文引用:1]
[12] 李芸瑛. 外源甜菜碱提高黄瓜幼苗抗冷性研究[D]. 广州: 华南师范大学, 2003. [本文引用:1]
[13] 黄丽华. 甜菜碱对玉米幼苗抗寒性的影响. 湖北农业科学, 2006, 45(2): 168-170. [本文引用:1]
[23] 李合生. 植物生理生化实验原理和技术[M]. 北京: 高等教育出版社, 2000. [本文引用:1]
[24] 郑海金, 华珞, 高占国. 草坪质量的指标体系与评价方法. 首都师范大学学报(自然科学版), 2003, 24(1): 78-82. [本文引用:1]
[25] 张仁和, 郭东伟, 张兴华, . 干旱胁迫下氮肥对玉米叶片生理特性的影响. 玉米科学, 2012, 20(6): 118-122. [本文引用:1]
[26] 戴玉池, 黄亮, 陈良碧. 5种抗寒剂对早稻相早籼25号幼苗的耐寒生理鉴定及其利用. 湖南师范大学自然科学学报, 2000, 23(3): 88-94. [本文引用:1]
[27] 梁广坚, 钟镜波, 邵玲. 暖地型草坪草绿叶生长剂对细叶结缕草抗寒性和叶绿素含量的影响. 草业科学, 2004, 21(8): 85-88. [本文引用:1]
[28] 牛永强, 高鹏, 路来明, . 草坪草的低温胁迫及抗寒性的研究进展. 山东农业科学, 2012, 44(3): 53-57. [本文引用:1]
[29] 蔡仕珍, 潘远智, 陈其兵, . 低温胁迫对花叶细辛生理生化及生长的影响. 草业学报, 2010, 19(1): 95-102. [本文引用:1]
[30] 郭郁频, 米福贵, 闫利军, . 不同早熟禾品种对干旱胁迫的生理响应及抗旱性评价. 草业学报, 2014, 23(4): 220-228. [本文引用:1]
[33] 王艳, 李建龙, 邓蕾, . H2O2对沟叶结缕草抗氧化系统及其耐寒性的影响. 中国草地学报, 2010, 32(2): 92-97. [本文引用:1]
[34] 孙玉洁, 金鹏, 单体敏, . 甜菜碱处理对枇杷果实采后冷害和活性氧代谢的影响. 食品科学, 2014, 35(14): 210-215. [本文引用:1]
[38] 任军, 黄志霖, 曾立雄, . 低温胁迫下植物生理反应机理研究进展. 世界林业研究, 2014, 26(6): 15-20. [本文引用:1]
[39] 张岩. 水稻低温生理及抗冷性的研究[D]. 延边: 延边大学, 2007. [本文引用:1]