扁蓿豆种内杂种鉴定及其F1和F2代主要农艺性状优势分析

doi:10.11686/cyxb2022337

摘要/Abstract

摘要：

扁蓿豆是一种抗逆性强，遗传多样性丰富的豆科牧草，可作为同属牧草的杂交育种材料，为其提供丰富的基因资源。而如何获得真杂交种是开展杂交育种和杂种优势利用的重要基础。为获得遗传性状更加丰富的扁蓿豆新种质材料，以株型直立且高产的直立型扁蓿豆和抗逆性强的野生扁蓿豆（黄花变异材料，简称黄花扁蓿豆）为亲本，采取正反交配置了两个杂交组合。通过相关序列扩增多态性（SRAP）分子标记技术从118个杂交F₁代中鉴定出85个真杂种。从直立型扁蓿豆♀×黄花扁蓿豆♂的杂种F₁代中获得其F₂代，进一步对表现优良的13株F₁代和20株F₂代的株高、株型指数、一级分枝数、近似叶面积、叶茎比和单株地上生物量等主要农艺性状进行杂种优势分析。结果表明：F₁代各性状的表型值变异系数为18.82%~45.72%，其中单株地上生物量、叶茎比、一级分枝数变异较大。各性状中亲优势为-54.2%~26.9%，其中叶茎比（8.22%）表现出超亲优势。F₂代各性状变异系数（19.66%~41.63%）较F₁代减小，除近似叶面积（12.69%）、株型指数（17.46%）和叶茎比（35.38%）外其余性状中亲优势（-52.38%~-19.75%）均减弱。F₁与F₂代产量相关性状的中亲优势和超亲优势多为负向，种内杂种优势较弱。研究结果将为扁蓿豆及苜蓿属其余牧草的品种改良提供新种质。

关键词: 扁蓿豆, SRAP分子标记, 杂种鉴定, 杂种优势

Abstract:

Medicago ruthenica is a leguminous forage crop with strong resistance to various stress factors and rich genetic diversity， which can be used as a cross breeding parent within the same forage genus as a source of rich genetic resources. Identification of a procedure to obtain true hybrids is an important component of cross breeding and heterosis utilization. In this study， in order to obtain new germplasm materials of M. ruthenica with more abundant genetic characters， two hybrid combinations were made by reciprocal crosses， using M. ruthenica cv. ‘Zhilixing’ with upright growth form and high yield， and a yellow-flowered variant of wild M. ruthenica var. Sojak with strong stress resistance as parents. 85 true hybrids were identified from 118 F₁ hybrids by sequence-related amplified polymorphism （SRAP） molecular marker technique. F₂ material was obtained from the true cross F₁ plants with excellent performance of M. ruthenica ‘Zhilixing’ ♀×M. ruthenica Sojak ♂， and further heterosis analysis was carried out on the main agronomic characters of 13 F₁and 20 F₂ plants for traits such as plant height， plant growth form， number of primary branches， approximate leaf area， leaf∶stem ratio and single plant aboveground biomass of single plants. It was found that the coefficients of variation of phenotypic values of F₁ traits ranged from 18.82% to 45.72%， among which the aboveground biomass per plant， leaf∶stem ratio and primary branch number varied most greatly. The parental dominance of each trait ranged from -54.2% to 26.9%， but only the leaf stem ratio （8.22%） showed superparental dominance. The coefficient of variation （19.66% to 41.63%） of each trait in F₂ was lower than that in F₁， and the heterosis （-52.38% to 19.75%） was weakened. In addition， the mid- and super-parent vigor of yield-related traits in F₁ and F₂ were mostly negative and the intraspecific heterosis was weak. This study will provide new germplasm for the improvement of M. ruthenica and other forages of the Medicago genus.

Key words: Medicago ruthenica, sequence related amplified polymorphism molecular markers, hybrid identification, heterosis

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图/表 9

图1 杂交亲本A：株型；B：茎；C：叶；D：花。每图中左边为直立型扁蓿豆，右边为野生黄花扁蓿豆。 A： Plant type； B： Stem； C： Leaf； D： Flower. The left side of each picture is M. ruthenica ‘Zhilixing’ and the right is wild M. ruthenica.

Fig.1 The hybrid parents

表1 SRAP引物信息

Table 1 Information of SRAP primer

正向引物Forward primer	序列Sequence （5' -3'）	反向引物Reverse primer	序列Sequence （5' -3'）
F₁	TGAGTCCAAACCGGAGC	R₁	GACTGCGTACGAATTTGC
F₂	CGAATCTTAGCCGGCAC	R₂	GACTGCGTACGAATTAAC
F₃	CGAATCTTAGCCGGAAT	R₃	GACACCGTACGAATTGAC
F₄	GTAGCACAAGCCGGAGC	R₄	GACACCGTACGAATTTGA
F₅	CGAATCTTAGCCGGATA	R₅	CGCACGTCCGTAATTCCA
F₆	TGAGTCCAAACCGGATA	R₆	GACTGCGTACGAATTAAT

表2 SRAP引物组合信息

Table 2 Information of SRAP combinations

标记编号 Primer number	引物组合 Primer combination	标记编号 Primer number	引物组合 Primer combination	标记编号 Primer number	引物组合 Primer combination
FR₁	F₁R₁	FR₁₃	F₁R₅	FR₂₅	F₅R₅
FR₂	F₁R₂	FR₁₄	F₂R₅	FR₂₆	F₆R₁
FR₃	F₁R₃	FR₁₅	F₃R₅	FR₂₇	F₆R₂
FR₄	F₁R₄	FR₁₆	F₄R₁	FR₂₈	F₆R₃
FR₅	F₂R₁	FR₁₇	F₄R₂	FR₂₉	F₆R₄
FR₆	F₂R₂	FR₁₈	F₄R₃	FR₃₀	F₆R₅
FR₇	F₂R₃	FR₁₉	F₄R₄	FR₃₁	F₁R₆
FR₈	F₂R₄	FR₂₀	F₄R₅	FR₃₂	F₂R₆
FR₉	F₃R₁	FR₂₁	F₅R₁	FR₃₃	F₃R₆
FR₁₀	F₃R₂	FR₂₂	F₅R₂	FR₃₄	F₄R₆
FR₁₁	F₃R₃	FR₂₃	F₅R₃	FR₃₅	F₅R₆
FR₁₂	F₃R₄	FR₂₄	F₅R₄	FR₃₆	F₆R₆

图2 FR9识别HZ F1群体的部分鉴定结果ZB为直立型扁蓿豆；HB为野生扁蓿豆；F1为以直立型扁蓿豆为母本的杂交第一代。ZB is the M. ruthenica ‘Zhilixing’；HB is the wild M. ruthenica；F1 is the first generation of cross with M. ruthenica ‘Zhilixing’ as female parent.

Fig.2 The part results of identification of HZ F1 population by FR9

图3 F1群体不同农艺性状的表现

Fig.3 The performance of different agronomic traits in F1 population

图4 F2群体不同农艺性状的表现

Fig.4 The performance of different agronomic traits in F2 population

图5 F2群体中ZH20在不同生长阶段的表现从左到右拍摄时间依次为5月15、5月30、6月13、7月15。From left to right， the shooting time is May 15， May 30， June 13 and July 15.

Fig.5 The performance of ZH20 at different growth stages in the F2 population

图6 杂交F1、F2群体不同农艺性状相关性*：P<0.05；**：P<0.01；***：P<0.001.A：一级分枝数Number of primary branches；B：近似叶面积Approximate leaf area；C：株型指数Plant type index；D：叶茎比Leaf stem ratio；E：植株绝对高度 Plant absolute height；F：单株地上生物量 Plant above-ground biomass

Fig.6 Correlation of different agronomic traits in F1 and F2 populations

表3 扁蓿豆杂交后代群体各数量性状的杂种优势

Table 3 Heterosis for different agronomic traits in M. ruthenica hybrid population

群体 Population	项目 Item	一级分枝数 Number of primary branches	近似叶面积 Approximate leaf area	株型指数 Plant type index	叶茎比 Leaf stem ratio	植株绝对高度 Plant absolute height	单株地上生物量 Plant above-ground biomass
F₁	中亲优势Hm	-16.15	26.90	11.11	21.54	5.57	-54.20
F₁	超亲优势Hh	-20.95	-9.42	-7.89	8.22	-8.99	-68.90
F₂	中亲优势Hm	-19.75	12.69	17.46	35.38	-26.26	-52.38
F₂	超亲优势Hh	-24.35	-19.57	-2.63	20.55	-36.43	-67.65

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扁蓿豆种内杂种鉴定及其F₁和F₂代主要农艺性状优势分析

Identification of Medicago ruthenica hybrids and heterosis analysis of main agronomic traits in F₁ and F₂

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