农杆菌介导的药百合鳞片遗传转化体系的建立

草业学报 ›› 2011, Vol. 20 ›› Issue (6): 164-169.

农杆菌介导的药百合鳞片遗传转化体系的建立

储俊^1,2,许娜¹,张强¹,王松华¹,周正义¹,金光明¹

1.安徽科技学院生命科学学院,安徽凤阳 233100;
2.中国科学技术大学生命科学学院,安徽合肥 230027

收稿日期:2010-10-08 出版日期:2011-06-25 发布日期:2011-12-20
作者简介:储俊(1979-),男,安徽潜山人,在读博士,讲师。E-mail:chujun@mail.ustc.edu.cn
基金资助:
安徽省教育厅自然科研一般项目(KJ2010B052,KJ2010B294)资助。

Establishment of an Agrobacterium tumefaciens-mediated genetic transformation system of Lilium speciosum

CHU Jun^1,2, XU Na¹, ZHANG Qiang¹, WANG Song-hua¹, ZHOU Zheng-yi¹, JIN Guang-ming¹

1.College of Life Science, University of Anhui Science & Technology, Fengyang 233100, China;
2.College of Life Science, University of Science and Technology of China, Hefei 230027, China

Received:2010-10-08 Online:2011-06-25 Published:2011-12-20

摘要/Abstract

摘要： 本试验以药百合鳞片高频再生体系为基础,研究了农杆菌介导的药百合鳞片遗传转化的几个影响因素。结果表明,预培养5 d有利于转化;共培养3 d并且添加100 μmol/L乙酰丁香酮有利于提高转化频率并抑制了农杆菌的过度生长;在侵染阶段添加150 μmol/L乙酰丁香酮,农杆菌侵染液pH 值5.7、光吸收值0.8,侵染时间10 min为最佳遗传转化体系。再生植株经gus基因的瞬时表达检测及hpt基因PCR检测证明载体已成功整合到药百合基因组中。

Abstract: Several factors, affecting Agrobacterium tumefaciens-mediated genetic transformations of lily were studied based on the establishment of regeneration systems. The pre-culture time of 5 days was beneficial for improving transformation frequency. Co-culture for 3 days with 100 μmol/L AS (acetosyringone) resulted not only in higher rates of transformation but also controlled the over-growth of bacteria. The 10-min bacteria infection (ABS₆₀₀= 0.8, pH=5.7) with 150 μmol/L AS was found to be the optimal selection for transgenic plantlets. It was confirmed by using gus instantaneous expression test and hpt gene PCR test that the vector was integrated into the regeneration genome of lily.

中图分类号:

储俊,许娜,张强,王松华,周正义,金光明. 农杆菌介导的药百合鳞片遗传转化体系的建立[J]. 草业学报, 2011, 20(6): 164-169.

CHU Jun, XU Na, ZHANG Qiang, WANG Song-hua, ZHOU Zheng-yi, JIN Guang-ming. Establishment of an Agrobacterium tumefaciens-mediated genetic transformation system of Lilium speciosum[J]. Acta Prataculturae Sinica, 2011, 20(6): 164-169.

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