添加亚油酸条件下不同剂量硝酸钠对水牛瘤胃体外发酵脂肪酸组成及相关微生物数量的影响

doi:10.11686/cyxb2020320

草业学报 ›› 2021, Vol. 30 ›› Issue (9): 159-167.DOI: 10.11686/cyxb2020320

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添加亚油酸条件下不同剂量硝酸钠对水牛瘤胃体外发酵脂肪酸组成及相关微生物数量的影响

郭艳霞(), 李孟伟, 唐振华, 彭丽娟, 彭开屏, 谢芳, 谢华德, 杨承剑()

中国农业科学院广西水牛研究所，农业农村部广西水牛遗传繁育重点实验室，广西南宁 530001

收稿日期:2020-07-07 修回日期:2020-09-27 出版日期:2021-08-30 发布日期:2021-08-30
通讯作者: 杨承剑
作者简介:Corresponding author. E-mail： ycj0746@sina.com
郭艳霞（1989-），女，河北邢台人，助理研究员，硕士。E-mail： gyxlq0417@163.com
基金资助:
国家自然科学基金项目(31560649);国家重点研发计划项目(2018YFD0501602);广西农业科技自筹经费项目(Z202045);广西水牛研究所基本科研业务费项目(水牛基200504)

Effects of different doses of sodium nitrate on fatty acid composition and microbial population in in vitro simulation of buffalo rumen fermentation with added linoleic acid

Yan-xia GUO(), Meng-wei LI, Zhen-hua TANG, Li-juan PENG, Kai-ping PENG, Fang XIE, Hua-de XIE, Cheng-jian YANG()

Key Laboratory of Buffalo Genetics，Breeding and Reproduction Technology，Ministry of Agriculture and Guangxi，Buffalo Research Institute，Chinese Academy of Agricultural Sciences，Nanning 530001，China

Received:2020-07-07 Revised:2020-09-27 Online:2021-08-30 Published:2021-08-30
Contact: Cheng-jian YANG

摘要/Abstract

摘要：

为了探究添加亚油酸条件下不同剂量硝酸钠对水牛瘤胃体外发酵脂肪酸组成及相关微生物数量的影响，本试验选用3头装有永久性瘤胃瘘管的母水牛，以精粗比40∶60为底物进行瘤胃液体外发酵试验。试验组硝酸钠的浓度分别为1、2、3 mg·mL^-1，对照组不加硝酸钠，每组均添加0.25 mg·mL^-1的亚油酸，每组各5个重复。在体外培养3、6、9、12、24 h时测定产气量和甲烷产量，24 h结束培养，测定瘤胃体外发酵参数、脂肪酸含量及瘤胃微生物数量。结果表明：1）添加硝酸钠显著降低了总产气量和甲烷产量（P<0.05）；2）添加硝酸钠pH值和氨态氮（NH₃-N）含量显著升高（P<0.05），异丁酸和异戊酸含量显著降低（P<0.05），而对总挥发性脂肪酸（TVFA）含量无显著性影响（P>0.05）；3）添加1 mg·mL^-1硝酸钠，C18：2cis-9，trans-11、C18：2trans-10，cis-12含量和不饱和脂肪酸/饱和脂肪酸（UFA/SFA）显著高于其他组（P<0.05），且C20：5n3 （EPA）含量显著高于添加3 mg·mL^-1硝酸钠组（P<0.05），添加2 mg·mL^-1硝酸钠C22：6n3 （DHA）含量显著高于其他组（P<0.05）；4）添加硝酸钠组原虫数量显著低于对照组（P<0.05），添加2、3 mg·mL^-1硝酸钠产甲烷菌数量显著低于添加1 mg·mL^-1硝酸钠组（P<0.05），添加1 mg·mL^-1硝酸钠总细菌、真菌、溶纤维丁酸弧菌、蛋白分解丁酸弧菌、非典型丁酸弧菌、亨氏丁酸弧菌数量显著高于其他组（P<0.05）。由此可得，体外法添加1~3 mg·mL^-1硝酸钠和0.25 mg·mL^-1亚油酸在维持水牛TVFA含量不变的情况下显著降低了甲烷含量，且1 mg·mL^-1硝酸钠能促进亚油酸生成共轭亚油酸（CLA），优化脂肪酸组成，并能增加大多数瘤胃微生物的数量。

关键词: 硝酸钠, 体外发酵, 甲烷, 生物氢化, 瘤胃微生物

Abstract:

This research explored the effects of different doses of sodium nitrate on the composition of fatty acids and the numbers of microorganisms in in vitro simulation of buffalo rumen fermentation with added linoleic acid. Three female buffaloes with permanent rumen fistula were used. The ratio of dietary concentrate to roughage was 40∶60. The experiment comprised five replicates of four experimental treatments： a blank control （CK） and addition of sodium nitrate at rates of 1， 2 or 3 mg·mL^-1， with 0.25 mg·mL^-1 linoleic acid added in each case. Gas and methane production were measured after 3， 6， 9， 12 and 24 h anaerobic incubation in vitro， and the fermentation parameters， fatty acid concentrations and numbers of rumen microorganisms were determined after 24 h incubation. It was found that adding sodium nitrate significantly reduced the total gas production and methane production （P<0.05）. Adding sodium nitrate also significantly increased the simulated rumen pH value and ammonia nitrogen （NH₃-N） concentration （P<0.05）， significantly reduced the contents of isobutyrate and isovaleriate （P<0.05）， but had no significant effects on the concentrations of total volatile fatty acids （TVFA）（P>0.05）. With the addition of 1 mg·mL^-1 sodium nitrate， the contents of C18：2cis-9， trans-11， C18：2trans-10， cis-12 and unsaturated/saturated fatty acid ratios were significantly higher than those in other groups （P<0.05）. The concentration of C20：5n3 （eicosapentaenoic acid） in the 1 mg·mL^-1 sodium nitrate group was significantly higher than that in the 3 mg·mL^-1 sodium nitrate group （P<0.05）， and the concentration of C22：6n3 （docosahexaenoic acid） with 2 mg·mL^-1 sodium nitrate added was significantly higher than that of other groups （P<0.05）. The number of protozoa in treatments with added sodium nitrate was significantly lower than for CK （P<0.05）. The number of methanogens in treatments with 2 and 3 mg·mL^-1 added sodium nitrate was significantly lower than in the 1 mg·mL^-1 sodium nitrate treatment （P<0.05）， and the numbers of bacteria， fungi， Butyrivibrio fibrisolvens， Butyrivibrio proteoclasticus， Atypical butyrivibrio， and Butyrivibrio hungatei in the 1 mg·mL^-1 sodium nitrate treatment were significantly higher than in other treatments （P<0.05）. In summary， the addition of 1-3 mg·mL^-1 sodium nitrate and 0.25 mg·mL^-1 linoleic acid in vitro significantly reduced methane generation while maintaining the TVFA concentration. Moreover， 1 mg·mL^-1 sodium nitrate promoted the formation of conjugated linoleic acid （CLA）， optimized fatty acid composition， and increased the numbers of most rumen microorganisms.

Key words: sodium nitrate, in vitro fermentation, methane, biohydrogenation, rumen microorganism

郭艳霞, 李孟伟, 唐振华, 彭丽娟, 彭开屏, 谢芳, 谢华德, 杨承剑. 添加亚油酸条件下不同剂量硝酸钠对水牛瘤胃体外发酵脂肪酸组成及相关微生物数量的影响[J]. 草业学报, 2021, 30(9): 159-167.

Yan-xia GUO, Meng-wei LI, Zhen-hua TANG, Li-juan PENG, Kai-ping PENG, Fang XIE, Hua-de XIE, Cheng-jian YANG. Effects of different doses of sodium nitrate on fatty acid composition and microbial population in in vitro simulation of buffalo rumen fermentation with added linoleic acid[J]. Acta Prataculturae Sinica, 2021, 30(9): 159-167.

图/表 5

参考文献 30

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项目Item	含量Content
底物Substrates
豆粕Soybean meal （%）	25.00
玉米Corn （%）	15.00
象草Elephant grass （%）	60.00
合计Total （%）	100.00
营养水平Nutrient levels
粗蛋白Crude protein （CP，%）	17.48
总能Gross energy （GE， MJ·kg^-1）	13.49
酸性洗涤纤维Acid detergent fiber （ADF，%）	29.09
中性洗涤纤维Neutral detergent fiber （NDF，%）	52.33
粗灰分Crude ash （Ash，%）	7.84
钙Calcium （Ca，%）	0.35
磷Phosphorus （P，%）	0.17

项目Item	含量Content
底物Substrates
豆粕Soybean meal （%）	25.00
玉米Corn （%）	15.00
象草Elephant grass （%）	60.00
合计Total （%）	100.00
营养水平Nutrient levels
粗蛋白Crude protein （CP，%）	17.48
总能Gross energy （GE， MJ·kg^-1）	13.49
酸性洗涤纤维Acid detergent fiber （ADF，%）	29.09
中性洗涤纤维Neutral detergent fiber （NDF，%）	52.33
粗灰分Crude ash （Ash，%）	7.84
钙Calcium （Ca，%）	0.35
磷Phosphorus （P，%）	0.17

菌株Strain	引物序列Primer sequences （5′-3′）	扩增长度Amplicon （bp）
总细菌Total bacteria^［15］	F：GTGSTGCAYGGYYGTCGTCA	123
总细菌Total bacteria^［15］	R：ACGTCRTCCMCNCCTTCCTC	123
真菌Total fungi^［13］	F：GAGGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTTTC	120
真菌Total fungi^［13］	R：CAAATTCACAAAGGGTAGGATGATT	120
原虫Protozoa^［13］	F：GCTTTCGWTGGTAGTGTATT	223
原虫Protozoa^［13］	R：CTTGCCCTCYAATCGTWCT	223
产甲烷菌Methanogens^［16］	F：TTCGGTGGATCDCARAGRGC	130
产甲烷菌Methanogens^［16］	R：GBARGTCGWAWCCGTAGAATCC	130
蛋白分解丁酸弧菌Butyrivibrio proteoclasticus^［14］	F：TCCGGTGGTATGAGATGGGC	185
蛋白分解丁酸弧菌Butyrivibrio proteoclasticus^［14］	R：GTCGCTGCATCAGAGTTTCCT	185
溶纤维丁酸弧菌Butyrivibrio fibrisolvens^［17］	F：GCCTCAGCGTCAGTAATCG	187
溶纤维丁酸弧菌Butyrivibrio fibrisolvens^［17］	R：GGAGCGTAGGCGGTTTTAC	187
亨氏丁酸弧菌Butyrivibrio hungatei^［14］	F：AGGGTAATGCCTGTAGCTC	264
亨氏丁酸弧菌Butyrivibrio hungatei^［14］	R：TCACCCTCGCGGGAT	264
非典型丁酸弧菌Atypical butyrivibrio^［14］	F：GACGGTGTATCAAGTCTGAAGTG	276
非典型丁酸弧菌Atypical butyrivibrio^［14］	R：GCCGGCACTGAAAGACTATGTC	276

菌株Strain	引物序列Primer sequences （5′-3′）	扩增长度Amplicon （bp）
总细菌Total bacteria^［15］	F：GTGSTGCAYGGYYGTCGTCA	123
总细菌Total bacteria^［15］	R：ACGTCRTCCMCNCCTTCCTC	123
真菌Total fungi^［13］	F：GAGGAAGTAAAAGTCGTAACAAGGTTTC	120
真菌Total fungi^［13］	R：CAAATTCACAAAGGGTAGGATGATT	120
原虫Protozoa^［13］	F：GCTTTCGWTGGTAGTGTATT	223
原虫Protozoa^［13］	R：CTTGCCCTCYAATCGTWCT	223
产甲烷菌Methanogens^［16］	F：TTCGGTGGATCDCARAGRGC	130
产甲烷菌Methanogens^［16］	R：GBARGTCGWAWCCGTAGAATCC	130
蛋白分解丁酸弧菌Butyrivibrio proteoclasticus^［14］	F：TCCGGTGGTATGAGATGGGC	185
蛋白分解丁酸弧菌Butyrivibrio proteoclasticus^［14］	R：GTCGCTGCATCAGAGTTTCCT	185
溶纤维丁酸弧菌Butyrivibrio fibrisolvens^［17］	F：GCCTCAGCGTCAGTAATCG	187
溶纤维丁酸弧菌Butyrivibrio fibrisolvens^［17］	R：GGAGCGTAGGCGGTTTTAC	187
亨氏丁酸弧菌Butyrivibrio hungatei^［14］	F：AGGGTAATGCCTGTAGCTC	264
亨氏丁酸弧菌Butyrivibrio hungatei^［14］	R：TCACCCTCGCGGGAT	264
非典型丁酸弧菌Atypical butyrivibrio^［14］	F：GACGGTGTATCAAGTCTGAAGTG	276
非典型丁酸弧菌Atypical butyrivibrio^［14］	R：GCCGGCACTGAAAGACTATGTC	276

项目 Item	硝酸钠浓度NaNO₃ concentration
项目 Item	0 mg·mL^-1	1 mg·mL^-1	2 mg·mL^-1	3 mg·mL^-1
总产气量Total gas production （mL·g^-1）	162.00±3.70a	77.00±5.35b	73.50±1.71b	72.50±5.68b
总甲烷量Methane production （mL·g^-1）	8.86±0.04a	2.78±0.06b	2.30±0.09c	2.01±0.03d
pH值pH value	6.71±0.01b	6.81±0.01a	6.82±0.01a	6.81±0.01a
氨态氮NH₃-N （mg·100 mL^-1）	12.84±0.17b	14.99±0.21a	15.01±0.30a	14.34±0.32a
微生物蛋白Microprotein （MCP， mg·mL^-1）	5.01±0.31	5.52±0.32	4.83±0.07	5.53±0.36
乙酸Acetate （mmol·L^-1）	11.87±0.23	11.33±0.28	10.93±0.40	11.99±0.59
丙酸Propionate （mmol·L^-1）	5.20±0.10	4.93±0.17	4.66±0.16	5.18±0.23
丁酸Butyrate （mmol·L^-1）	1.22±0.02	1.39±0.03	1.24±0.07	1.30±0.08
异丁酸Isobutyrate （mmol·L^-1）	0.17±0.001a	0.15±0.001bc	0.14±0.01c	0.16±0.001b
戊酸Valerate （mmol·L^-1）	0.14±0.001	0.13±0.001	0.13±0.001	0.14±0.01
异戊酸Isovalerate （mmol·L^-1）	0.37±0.01a	0.31±0.01b	0.31±0.01b	0.34±0.01a
总挥发性脂肪酸Total volatile fatty acid （TVFA， mmol·L^-1）	18.97±0.36	18.24±0.49	17.41±0.63	19.12±0.92
乙酸/丙酸Acetate to propionate ratio	2.28±0.01	2.31±0.04	2.34±0.02	2.31±0.01

添加亚油酸条件下不同剂量硝酸钠对水牛瘤胃体外发酵脂肪酸组成及相关微生物数量的影响

Effects of different doses of sodium nitrate on fatty acid composition and microbial population in in vitro simulation of buffalo rumen fermentation with added linoleic acid

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[13]	孟梅娟, 涂远璐, 白云峰, 严少华, 高立鹏, 刘萍. 小麦秸秆与米糠粕瘤胃体外发酵组合效应研究[J]. 草业学报, 2016, 25(9): 161-172.
[14]	王晓成, 刘军花, 朱伟云, 毛胜勇. 瘤胃源酵母的分离筛选及对不同底物发酵能力影响[J]. 草业学报, 2016, 25(5): 141-148.
[15]	高小叶, 袁世力, 吕爱敏, 周鹏, 安渊. DNDC模型评估苜蓿绿肥对水稻产量和温室气体排放的影响[J]. 草业学报, 2016, 25(12): 14-26.

项目 Item	硝酸钠浓度NaNO₃concentration
项目 Item	0 mg·mL^-1	1 mg·mL^-1	2 mg·mL^-1	3 mg·mL^-1
C6：0	0.15±0.04c	0.20±0.04bc	0.30±0.03b	0.45±0.03a
C8：0	1.60±0.22	1.22±0.48	2.07±0.10	1.78±0.07
C10：0	0.38±0.04b	0.38±0.30b	0.56±0.04a	0.58±0.05a
C11：0	0.26±0.02	0.26±0.06	0.20±0.02	0.26±0.05
C12：0	0.47±0.04	0.43±0.03	0.43±0.05	0.42±0.02
C13：0	6.03±2.02	4.95±0.19	2.74±0.23	2.68±0.20
C14：1n5	0.90±0.03	0.95±0.05	0.90±0.06	0.82±0.06
C14：0	3.02±0.28	3.58±0.26	3.25±0.29	0.82±0.06
C15：0	3.23±0.55	3.97±0.75	2.43±0.23	2.86±0.23
C16：1n7	0.36±0.07	0.36±0.03	0.70±0.28	0.89±0.30
C16：0	51.53±9.19	55.85±2.27	48.91±3.40	54.87±7.97
C17：0	1.86±0.31	2.30±0.44	1.45±0.18	1.94±0.21
C18：3n6	0.71±0.10	1.01±0.13	0.93±0.15	0.82±0.09
C18：3n3	0.55±0.16	0.60±0.12	0.97±0.33	0.56±0.22
C18：2n6c	15.27±3.28	16.30±0.72	11.54±2.16	9.33±2.97
t11-C18：1	12.12±2.01b	13.85±0.56ab	14.89±1.39ab	17.92±1.73a
C18：1n9c	35.96±6.95	49.75±9.74	31.94±7.14	51.53±4.94
C18：0	75.94±15.85	61.13±1.01	54.84±4.48	69.30±9.17
C18：2 cis-9，trans-11	0.67±0.16b	1.13±0.23a	0.42±0.03b	0.49±0.01b
C18：2 trans-10，cis-12	0.51±0.11b	0.92±0.09a	0.43±0.14b	0.38±0.07b
C19：0	0.33±0.04b	0.37±0.03b	0.41±0.04b	0.62±0.09a
C20：4n6	0.94±0.31	0.93±0.13	0.88±0.38	0.43±0.07
C20：5n3 （EPA）	0.62±0.18ab	0.80±0.08a	0.59±0.10ab	0.34±0.07b
C20：2n6	0.42±0.03	0.74±0.18	0.75±0.19	0.68±0.08
C20：3n6	4.93±1.48	4.66±0.36	3.55±1.20	2.62±1.37
C20：1	1.29±0.56	1.72±0.74	0.37±0.10	0.67±0.23
C20：3n3	0.44±0.12	0.81±0.29	0.29±0.03	0.44±0.10
C20：0	2.76±0.56	3.42±0.68	2.44±0.30	3.42±0.60
C21：0	4.06±1.20a	2.15±0.46ab	4.04±1.20a	1.10±0.16b
C22：6n3 （DHA）	0.69±0.13b	0.40±0.08b	1.02±0.29a	0.65±0.10b
C22：2n6	78.51±2.28a	76.49±5.62a	9.83±4.15b	5.67±1.84b
C22：1n9	0.68±0.13a	0.44±0.06ab	0.27±0.08b	0.59±0.02a
C22：0	0.95±0.19	1.42±0.45	0.87±0.16	1.47±0.31
C23：0	0.90±0.18	0.86±0.24	0.87±0.31	0.51±0.07
C24：1n9	0.32±0.04	2.25±1.69	0.82±0.16	0.65±0.21
C24：0	4.15±1.38	3.48±0.70	3.16±0.38	2.56±0.41
SFA	179.27±29.24	151.60±5.03	134.79±4.31	156.13±15.06
MUFA	51.62±8.88	69.31±9.60	49.88±8.58	73.07±5.53
PUFA	104.25±24.28a	104.78±6.18a	31.19±6.26b	22.39±6.44b

项目 Item	硝酸钠浓度NaNO₃concentration
项目 Item	0 mg·mL^-1	1 mg·mL^-1	2 mg·mL^-1	3 mg·mL^-1
C6：0	0.15±0.04c	0.20±0.04bc	0.30±0.03b	0.45±0.03a
C8：0	1.60±0.22	1.22±0.48	2.07±0.10	1.78±0.07
C10：0	0.38±0.04b	0.38±0.30b	0.56±0.04a	0.58±0.05a
C11：0	0.26±0.02	0.26±0.06	0.20±0.02	0.26±0.05
C12：0	0.47±0.04	0.43±0.03	0.43±0.05	0.42±0.02
C13：0	6.03±2.02	4.95±0.19	2.74±0.23	2.68±0.20
C14：1n5	0.90±0.03	0.95±0.05	0.90±0.06	0.82±0.06
C14：0	3.02±0.28	3.58±0.26	3.25±0.29	0.82±0.06
C15：0	3.23±0.55	3.97±0.75	2.43±0.23	2.86±0.23
C16：1n7	0.36±0.07	0.36±0.03	0.70±0.28	0.89±0.30
C16：0	51.53±9.19	55.85±2.27	48.91±3.40	54.87±7.97
C17：0	1.86±0.31	2.30±0.44	1.45±0.18	1.94±0.21
C18：3n6	0.71±0.10	1.01±0.13	0.93±0.15	0.82±0.09
C18：3n3	0.55±0.16	0.60±0.12	0.97±0.33	0.56±0.22
C18：2n6c	15.27±3.28	16.30±0.72	11.54±2.16	9.33±2.97
t11-C18：1	12.12±2.01b	13.85±0.56ab	14.89±1.39ab	17.92±1.73a
C18：1n9c	35.96±6.95	49.75±9.74	31.94±7.14	51.53±4.94
C18：0	75.94±15.85	61.13±1.01	54.84±4.48	69.30±9.17
C18：2 cis-9，trans-11	0.67±0.16b	1.13±0.23a	0.42±0.03b	0.49±0.01b
C18：2 trans-10，cis-12	0.51±0.11b	0.92±0.09a	0.43±0.14b	0.38±0.07b
C19：0	0.33±0.04b	0.37±0.03b	0.41±0.04b	0.62±0.09a
C20：4n6	0.94±0.31	0.93±0.13	0.88±0.38	0.43±0.07
C20：5n3 （EPA）	0.62±0.18ab	0.80±0.08a	0.59±0.10ab	0.34±0.07b
C20：2n6	0.42±0.03	0.74±0.18	0.75±0.19	0.68±0.08
C20：3n6	4.93±1.48	4.66±0.36	3.55±1.20	2.62±1.37
C20：1	1.29±0.56	1.72±0.74	0.37±0.10	0.67±0.23
C20：3n3	0.44±0.12	0.81±0.29	0.29±0.03	0.44±0.10
C20：0	2.76±0.56	3.42±0.68	2.44±0.30	3.42±0.60
C21：0	4.06±1.20a	2.15±0.46ab	4.04±1.20a	1.10±0.16b
C22：6n3 （DHA）	0.69±0.13b	0.40±0.08b	1.02±0.29a	0.65±0.10b
C22：2n6	78.51±2.28a	76.49±5.62a	9.83±4.15b	5.67±1.84b
C22：1n9	0.68±0.13a	0.44±0.06ab	0.27±0.08b	0.59±0.02a
C22：0	0.95±0.19	1.42±0.45	0.87±0.16	1.47±0.31
C23：0	0.90±0.18	0.86±0.24	0.87±0.31	0.51±0.07
C24：1n9	0.32±0.04	2.25±1.69	0.82±0.16	0.65±0.21
C24：0	4.15±1.38	3.48±0.70	3.16±0.38	2.56±0.41
SFA	179.27±29.24	151.60±5.03	134.79±4.31	156.13±15.06
MUFA	51.62±8.88	69.31±9.60	49.88±8.58	73.07±5.53
PUFA	104.25±24.28a	104.78±6.18a	31.19±6.26b	22.39±6.44b

项目 Item	硝酸钠浓度NaNO₃ concentration
项目 Item	0 mg·mL^-1	1 mg·mL^-1	2 mg·mL^-1	3 mg·mL^-1
总细菌Total bacteria （×10¹⁰）	10.16±1.64b	18.82±2.03a	8.29±2.06b	7.41±1.57b
真菌Total fungi （×10¹⁰）	2.57±0.39b	4.31±0.51a	1.46±0.46b	1.25±0.08b
原虫Protozoa （×10⁷）	33.50±7.94a	4.46±1.37b	0.51±0.34b	0.13±0.01b
产甲烷菌Methanogens （×10⁹）	3.13±0.38ab	3.92±0.53a	1.58±0.58bc	1.01±0.07c
溶纤维丁酸弧菌B. fibrisolvens （×10⁸）	1.20±0.22b	11.18±1.34a	4.23±1.56b	2.76±1.12b
蛋白分解丁酸弧菌B. proteoclasticus （×10⁸）	0.78±0.13b	3.52±0.43a	1.34±0.31b	1.60±0.10b
非典型丁酸弧菌A. butyrivibrio （×10⁶）	4.55±2.02c	46.29±5.04a	18.31±3.75b	0.69±0.05c
亨氏丁酸弧菌B. hungatei （×10⁷）	4.00±0.67b	13.26±0.71a	2.54±1.26bc	0.23±0.02c

项目 Item	硝酸钠浓度NaNO₃ concentration
项目 Item	0 mg·mL^-1	1 mg·mL^-1	2 mg·mL^-1	3 mg·mL^-1
总细菌Total bacteria （×10¹⁰）	10.16±1.64b	18.82±2.03a	8.29±2.06b	7.41±1.57b
真菌Total fungi （×10¹⁰）	2.57±0.39b	4.31±0.51a	1.46±0.46b	1.25±0.08b
原虫Protozoa （×10⁷）	33.50±7.94a	4.46±1.37b	0.51±0.34b	0.13±0.01b
产甲烷菌Methanogens （×10⁹）	3.13±0.38ab	3.92±0.53a	1.58±0.58bc	1.01±0.07c
溶纤维丁酸弧菌B. fibrisolvens （×10⁸）	1.20±0.22b	11.18±1.34a	4.23±1.56b	2.76±1.12b
蛋白分解丁酸弧菌B. proteoclasticus （×10⁸）	0.78±0.13b	3.52±0.43a	1.34±0.31b	1.60±0.10b
非典型丁酸弧菌A. butyrivibrio （×10⁶）	4.55±2.02c	46.29±5.04a	18.31±3.75b	0.69±0.05c
亨氏丁酸弧菌B. hungatei （×10⁷）	4.00±0.67b	13.26±0.71a	2.54±1.26bc	0.23±0.02c